La metilación del ADN paterno podría estar relacionada con la edad gestacional

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La metilación del ADN paterno podría estar asociada con la edad gestacional al inicio

Antecedentes: No se conoce del todo cómo las modificaciones epigenéticas del ADN se asocian a la edad gestacional en el momento del parto. Hemos investigado los posibles resultados de la metilación diferencial del ADN paterno (DNAm) en la edad gestacional de la descendencia en el momento del suministro mediante la realización de una búsqueda epigenómica de sitios web de citosina-fosfato-guanina (CpG).

Métodos: Los miembros del análisis abarcan a los miembros masculinos de la cohorte o compañeros de la generación F1 de la cohorte de inicio de la Isla de Wight (IoWBC). Los rangos de ADNm en sangre periférica de los padres de la F1 (n = 92) recogidos durante el embarazo de sus cónyuges fueron analizados utilizando el array Illumina 450Okay. Se llevó a cabo un análisis estadístico de 5 pasos. En primer lugar, se utilizó una técnica de cribado de pruebas de formación para elegir los sitios web de CpG que es tal vez con toda probabilidad asociados a la edad gestacional en el suministro.

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En segundo lugar, se empleó el análisis de enriquecimiento sensible para descubrir los procesos naturales. En tercer lugar, mediante la centralización en genes biológicamente informativos, se han utilizado modas de riesgos proporcionales de Cox para medir los cocientes de riesgo de CpGs paternos individuales específicos sobre la edad gestacional ajustando los factores de confusión. En cuarto lugar, para evaluar la validez de nuestros resultados, distinguimos nuestras correlaciones CpG-edad gestacional dentro de un análisis de Born into Life en Suecia (n = 15). Por último, investigamos la correlación entre los CpGs detectados y la expresión génica diferencial en la sangre del cable F2 a lo largo del IoWBC.

Resultados: El análisis del ADNm de los padres recogido en el embarazo de su confederada reconoció 216 sitios web CpG significativamente asociados a la edad gestacional en el momento del suministro. Los análisis de las vías de enriquecimiento sensible de los genes anotados revelaron 2 vías naturales significativamente relacionadas con las moléculas de adhesión de la membrana celular.

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La metilación diferencial de 9 CpGs relacionados con la vía de adhesión a la membrana celular se ha asociado significativamente a la edad gestacional en el momento del suministro tras el ajuste por factores de confusión. La muestra de replicación confirmó los coeficientes de correlación de dos CpGs relacionados con la vía con la edad gestacional en el momento del suministro dentro de los intervalos de confianza del 95% de los coeficientes de correlación en IoWBC. Por último, los sitios web CpG de los grupos de genes de protocadherina (PCDH) se han asociado a la expresión génica de PCDH en la sangre de los cables F2.

Conclusiones: Nuestros hallazgos defienden que el ADNm paterno diferencial puede afectar a la edad gestacional en el suministro por las moléculas de adhesión de la membrana celular. Los resultados son novedosos, sin embargo, requieren una futura replicación en una cohorte aún mayor.

Contribuciones distintas de la metilación del ADN y la acetilación de las histonas a la ocupación genómica de los componentes de la transcripción

Las modificaciones epigenéticas en la cromatina desempeñan un papel muy importante en la regulación de la expresión génica. Aunque los estados de la cromatina suelen estar dominados por el desarrollo de múltiples capas, la forma en que las vías individuales específicas contribuyen a la expresión génica sigue siendo poco conocida. Como una ilustración, la metilación del ADN se sabe que manejar la transcripción desafío vinculante sin embargo, junto con reclutar metil-CpG proteínas de unión que afectan el desarrollo de la cromatina por el tren de la histona deacetilasa complejos (HDACs).

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Cada uno de estos mecanismos puede, con toda probabilidad, afectar a la expresión génica, sin embargo, la importancia de cada uno, y si estas acciones están incorporadas o no para comprender la regulación génica aceptable, permanece en gran parte desconocida.

Para hacer frente a esta importante cuestión, hemos medido la expresión génica, la accesibilidad de la cromatina, y la ocupación del desafío de la transcripción en células madre embrionarias de ratón de tipo salvaje o con deficiencia de metilación de ADN después de la inhibición de HDAC.

Observamos un aumento generalizado de la accesibilidad a la cromatina en los retrotransposones cuando se inhiben las HDACs, y esto se magnifica cuando las células carecen además de metilación del ADN. Un subconjunto de estos elementos ha elevado la unión de los elementos de transcripción YY1 y GABPA y la expresión elevada.

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La pronunciada influencia aditiva de la inhibición de las HDAC en las células deficientes en metilación del ADN demuestra que la metilación del ADN y la desacetilación de las histonas actúan en gran medida de forma independiente para suprimir la unión de los elementos de transcripción y la expresión de los genes.

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Identificación de la expresión superior del regulador de la replicación del ADN MCM y su significado pronóstico en el carcinoma hepático

Antecedentes: El mantenimiento de microliposomas (MCM) superior, MCM2-7, se revela como implicado en bastantes procesos celulares y desempeña un lugar clave a lo largo del progreso y crecimiento de los cánceres humanos. Sin embargo, el MCM superior permanece poco elaborado en el carcinoma hepático (HCC).

Resultados: MCM2-7 fue significativamente elevado en los tejidos de HCC en comparación con los tejidos de hígado común. El grado extremo de MCM2-7 tenía una correlación constructiva con el mal pronóstico. No obstante, las alteraciones de MCM2-7 no se correlacionaron con una mala SG. Los MCM han sido todos elevados en las cepas celulares de HCC en comparación con la línea celular de hepatocitos estándar. Además, se encontró una correlación constructiva entre las MCM en las cepas celulares de HCC.

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Conclusiones: El MCM superior fue elevado en los tejidos y cepas celulares de HCC y se correlacionó negativamente con el pronóstico, lo que puede ser biomarcadores muy importantes para el HCC.

Un Protocolo de Inmunización Genética Fácil y Amigable con el Medio Ambiente para la Fabricación de Anticuerpos Policlonales y Monoclonales Extremadamente Particulares contra el Tipo Nativo de Proteínas de Mamíferos

Hemos generado anticuerpos policlonales y monoclonales mediante inmunización genética durante los últimos veinte años. En este artículo, presentamos nuestra metodología más rentable adquirida durante estos años y presentamos los animales durante los cuales obtuvimos los mejores índices de éxito. El enfoque introducido es práctico, sencillo, barato y genera anticuerpos frente a las proteínas de mamíferos de su tipo nativo.

Este protocolo no requiere ni un equipo costoso, como una pistola de genes, ni métodos refinados como la conjugación de microesferas de oro, la electroporación, o el procedimiento quirúrgico para inyectar en los ganglios linfáticos. El protocolo introducido hace uso simplemente del plásmido purificado que expresa la proteína de interés bajo un potente promotor, que se inyecta en sitios intramusculares e intradérmicos.

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Este sistema se examinó en 5 especies. Los cobayas fueron los animales seleccionados para la fabricación de anticuerpos policlonales. Los anticuerpos monoclonales podían generarse en ratones administrando, como inyección final, una suspensión de células transfectadas.

Los anticuerpos detectaban los antígenos de sus tipos nativos. Fueron extremadamente particulares, con rangos de fondo no específicos muy bajos, como se evaluó mediante inmunotransferencia, inmunocitoquímica, inmunohistoquímica y citometría de circulación. Presentamos aquí un proceso profundo y fácil para aumentar eficazmente los anticuerpos particulares en oposición a las proteínas nativas.

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